Читайте также:
|
|
При изучении вопроса о природе и методе определения пектиновых веществ слeдyeт учесть, что пектиновые вещества являются важным компонентом, растительных клеток. Они представляют собой высокомолекулярные соединения углеводной природы, производные полигалактуроновой (пектовой) кислоты.
Под термином «пектиновые вещества» подразумевают следующие соединения: пектовые кислоты, пектиновые кислоты, пектины, протопектины. Это разделение в значительной мере основано на степени метоксилирования карбоксильных групп пектовой кислоты.
Mолекулы пектовой или полигалактуроновой кислоты полностью лишены метоксильных групп. Пектиновая кислота представляет собой высокомолекулярную полигалактуроновую кислоту, часть карбоксильных групп которой этерифицирована метиловым спиртом.
Пектин - пектиновые кислоты, карбоксильные группы которых в различной степени метоксилированы и нейтрализованы
Протопектин- условное название соединений, характеризующихся в основном нерастворимостью в воде и способностью при осторожном гидролизе давать пектин. Гидролиз протопектина происходит при обработке разбавленными кислотами, щелочами, либо под действием фермента протопектиназы.
Протопектин обусловливает твердость тканей плодов и овощей, входит в состав клеточных cтенок и срединных пластинок, его много в незрелых плодах.
Пектиновые вещества в клетках растений находятся в соединении с целлюлозами и гемицеллюлозами, причем форма их связи точно не установлена.
Количественное определение пектиновых веществ основано на способности пектовой кислоты давать нерастворимую соль - пектат кальция, количество которого определяют весовым методом.
Приступая к определению пектиновых веществ, параллельно готовят вытяжку и высушивают до постоянной массы бюкс с небольшим фильтром, через который в дальнейшем отфильтровывают осадок пектата кальция. На доведение бюкса с фильтром до постоянной массы требуется около 6 ч.
Техника определения. Измельченную навеску (25 гдля сырого материала и 5 гдля высушенного) с помощью 100 млводы помещают в химический стакан емкостью 400-500 мл,доливают 50 мл10 %-ной соляной кислоты. Уровень жидкости отмечают восковым карандашом. Стакан ставят на сетку и кипятят в течение 30 мин, периодически доливая до метки кипящей дистиллированной водой. При кипячении происходит гидролиз протопектина и получается водная вытяжка пектиновых веществ.
Содержимое стакана кипятят около 5 мин (для полного осаждения пектата кальция) и фильтруют через заранее высушенный взвешенный фильтр. Осадок на фильтре промывают горячей водой до тех пор, пока промывная вода перестает давать с АgNО3 белую муть, свидетельствующую о присутствии в стекающей жидкости хлора (качественную реакцию проводят после 4-5 кратного промывания осадка на фильтре, для чего несколько капель промывных вод собирают в отдельную колбочку).
После кипячения содержимое стакана охлаждают и переносят в мерную колбу емкостью 250 мл, доливают водой до метки и фильтруют через складчатый фильтр. 25 мл прозрачного фильтрата переносят пипеткой в большую коническую колбу, прибавляют 100 мл0,1 н раствора NaOH и оставляют на 5 ч (можно оставить на ночь) для омыления. При этом пектин распадается на натриевую соль пектовой кислоты и метиловый спирт. После этого добавляют 50 мл6% -ного раствора уксусной кислоты (для получения свободной пектовой кислоты), а через 5 мин - 50 мл, 11 % -ного раствора хлористого кальция и оставляют на 30 мин. В растворе появляется хлопьевидный беловатый осадок пектата кальция
Фильтр с осадком слегка подсушивают на воронке, а затем, помещают в бюкс и высушивают при 100 °С ДО постоянной массы. Высушенный бюкс с фильтром взвешивают и определяют процент содержания пектата кальция. Для пересчета на пектовую кислоту найденную величину пектата кальция (в %) умножают на 0,9235.
Содержание пектиновых веществ (Х) вычисляют по формуле:
(2.10.1)
где а - масса пектата кальция на фильтре, г;
Н - масса навески, г;
V1 - объем всей вытяжки, мл;
V 2 - объем вытяжки, взятой для омыления, мл;
0,9235- коэффициент перевода пектата кальция на пектовую кислоту.
Результаты исследования рекомендуется записать в виде табл. 13.
Таблица 13 – Результаты определения пектиновых веществ в плодах и овощах
Объект исследования | Масса навески, г | Постоянная масса, г | Масса пектата Са, г | Содержание пектовой кислоты | |
Бюкса с фильтром | Бюкса с фильтром и осадком | ||||
Отдельно должны быть записаны результаты исследования по доведению бюксов до постоянной массы.
Схема методики количественного определения пектиновых веществ
+СаCl2
| |||||||
+Н2О +NaOH
- гидролиз омыление
пектат количественное
натрия СН3СООН определение
взвешиванием
Рисунок 2 - Схема методики количественного определения пектиновых веществ
1 Извлечение пектиновых веществ из навески.
1.1 Измельчение исследуемого объекта.
1.2 Отбор и взвешивание навеской.
1.3 Гидролиз протопектина при кипячении для перевода в растворимый пектин.
1.4 Растворение пектина и пектовой кислоты при нагревании.
2 Удаление посторонних примесей.
2.1 Фильтрование.
3 Получение конечного вещества, определяемого взвешиванием.
3.1Омыление пектина до пектата натрия.
3.2 Перевод пектата натрия в пектовую кислоту с помощью уксусной кислоты.
3.3 Осаждение пектовой кислоты - конечного продукта распада пектиновых веществ в виде пектата кальция.
4 Количественное определение пектата кальция.
4.1 Отделение осадка пектата кальция фильтрованием.
4.2 Удаление избытка хлористого кальция промыванием осадка горячей водой.
4.3 Высушивание до постоянной массы.
4.4 Периодическое взвешивание для установления постоянной массы.
4.5 Расчет полученных результатов.
Дата добавления: 2015-09-11; просмотров: 19 | Поможем написать вашу работу | Нарушение авторских прав |
<== предыдущая лекция | | | следующая лекция ==> |
Определение содержания аскорбиновой кислоты | | | Орнамент Египта. |