Студопедия  
Главная страница | Контакты | Случайная страница

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Хлорофос

Выделение хлорофоса из биологического материала.
В колбу вместимостью 500 мл вносят 100 г измельчённого биологического материала и 150 мл воды, подкислённой серной кислотой до рН~2,0...2,5. Смесь оставляют на 2 ч, часто перемешивая, затем процеживают через марлю. К биологическому материалу ещё два раза прибавляют воду, подкислённую до рН 2,0...2,5 (по 75 мл) и каждый
раз настаивают по 1 ч, а затем сливают водные вытяжки. Объединённые кислые водные вытяжки центрифугируют. Центрифугат переносят в делительную воронку, прибавляют 30 мл хлороформа и смесь взбалтывают 10 мин. Хлороформную вытяжку сливают. Хлорофос из кислой водной вытяжки еще 4 раза экстрагируют хлороформом (по 30 мл).

Хлороформные вытяжки соединяют и выпаривают при комнатной температуре досуха. Сухой остаток растворяют в 5 мл воды, затем раствор используют для обнаружения хлорофоса.

Обнаружение хлорофоса

 

Для обнаружения хлорофоса применяют цветные реакции, холинэстеразную пробу и метод хроматографии.

Реакция с пиридином и щелочью (реакция Фудживара).

В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора, 1 мл пиридина и 1 мл 30 %-го раствора гидроксида натрия. Смесь нагревают на кипящей бане 5 мин. При наличии хлорофоса в пробе появляется красная окраска или розовая окраска. Предел обнаружения: 10 мкг хлорофоса.

Эту реакцию даёт также ряд хлорсодержащих соединений алифатического ряда.

Реакция с резорцином. В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора, 2 капли 1 %-го раствора резорцина в 20 %-м растворе карбоната натрия или 1 %-м растворе гидроксида натрия. Через 10 мин появляется розовая окраска, а через 15-30 мин наблюдается жёлто-зеленая флуоресценция раствора. Окраска и флуоресценция раствора достигают максимума через 1-2 ч после прибавления реактивов к исследуемому раствору. Через 4-6 часов розовая окраска переходит в оранжевый а затем в жёлтый цвет. Флуоресценция раствора сохраняется несколько суток. Предел обнаружения: 40 мкг хлорофоса в пробе.

Для обеспечения возможности протекания реакции необходимо, чтобы рН среды составлял 9,0... 11,0

Реакция образования изонитрила. В пробирку вносят 0,01-0,03 г исследуемого вещества и 1 мл этилового спирта. Смесь взбалтывают, затем прибавляют 2 мл 10 %-го спиртового раствора гидроксида натрия и 1 каплю анилина. При нагревании смеси ощущается характерный запах изонитрила.

Реакция неспецифична. Её дают хлороформ, ДДВФ и некоторые
другие хлорсодержащие вещества.

Реакция с о-толидином. В фарфоровую чашку вносят 0,2-0,5 мл водного или спиртового раствора исследуемого вещества, 1 мл 0,5 %-го раствора о-толидина в ацетоне и 1 мл смеси растворов пероксида водорода и гидроксида натрия. В присутствии хлорофоса появляется желтая или оранжевая окраска.

Эту реакцию дают метафос, тиофос и др.

Приготовление смеси пероксида водорода и щёлочи. К 3 мл
0,55 %-го водного раствора гидроксида натрия прибавляют 2 мл 3 %-го раствора пероксида водорода.

Реакция с 2,4-динитрофенилгидразином. В пробирку вносят 1 - 10 капель исследуемого раствора и 2 капли 1 н. раствора гидроксида натрия. Через 20 мин прибавляют 1 каплю 0,1 %-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 4 н. растворе соляной кислоты. Пробирку выдерживают в кипящей водяной бане 30 мин. После этого смесь охлаждают, прибавляют 1 каплю 4 н. раствора гидроксида натрия и 0,5 мл этилово­го спирта. При наличии хлорофоса в пробе появляется синяя или сииефиолетовая окраска.

Эту реакцию дают ДДВФ, тиофос и др.

Реакиия с ацетоном. В пробирку вносят 0,1-0,5 мл раствора исследуемого вещества в этиловом спирте, прибавляют 1 мл ацетона и 0,5 мл 0,5 н. спиртового раствора гидроксида натрия. При наличии хлорофоса в пробе через 5-15 мин появляется розовая окраска, переходящая и оранжевую.

Холинэстеразная проба. Хлорофос понижает активность ацетилхолинестеразы, которая теряет способность разлагать ацетилхолин. Выполнение этой пробы описано выше.

Обнаружение хлорофоса методом хроматографии. Пластинка с тонким слоем силикагеля КСК, закрепленная гипсом, на стартовую линию которого нанесены исследуемая проба и раствор «свидетеля». Система: смесь равных объёмов н-гексана и ацетона. Проявитель: смесь 2 %-го водного раствора резорцина и 10 % раствора карбоната натрия, взятых в соотношении 2:3. Пластинку нагревают 7-10 мин. в сушильном шкафу при 100°С, при наличии хлорофоса пятна на пластинке приобретают оранжевую окраску.


Дата добавления: 2015-01-30; просмотров: 11 | Нарушение авторских прав




lektsii.net - Лекции.Нет - 2014-2018 год. (0.012 сек.) Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав