Читайте также:
|
|
Гормон | Основное действие | Клетки-мишени |
Инсулин | Увеличивает захват глюкозы клеткой гликогенез Уменьшает глюконеонегез гликогенолиз | Миоциты, адипоциты Миоциты, гепатоциты Гепатоциты Гепатоциты |
Глюкагон | Увеличивает гликогенолиз Глюконеогенез | Гепатоциты Гепатоциты |
Адреналин | Увеличивает гликогенолиз | Гепатоциты, миоциты |
Соматотропин | Увеличивает гликогенолиз | Гепатоциты |
Кортизол | Увеличивает глюконеогенез Уменьшает захват глюкозы клеткой | Гепатоциты Периферические клетки |
Нормальный уровень глюкозы в крови составляет 3,33-5,55 ммоль/л, тогда как другие углеводы, такие как фруктоза, манноза, галактоза, лактоза и мальтоза обнаруживаются в следовых количествах. Помимо углеводов в крови содержится ряд редуцируюших веществ: глютатион, АДФ, мочевая кислота, эрготионин, креатинин, глюкуроновые кислоты, витамин С. Совокупность всех восстанавливающих веществ называется общим сахаром крови. Его колебания в норме составляют 4,44-6,66 ммоль/л.
Существует множество различных методов оценки уровня гликемии. К ним относят редуктометрические методы, основанные на свойстве глюкозы и других редуцирующих веществ восстанавливать ионы металлов в щелочной среде. К этим методам можно причислить и ставший уже «историческим» титриметрический способ Хагедорна-Йенсена, в котором используется способность альдогексозы восстанавливать при кипячении в щелочной среде железосинеродистый калий (красную кровяную соль) в железистосинеродистый калий (желтую кровяную соль). Ввиду того, что в плазме крови присутствует ряд соединений, не относящихся к углеводам, но обладающих восстанавливающими свойствами, определяемая с использованием редуктометрических методов концентрация сахара в крови оказывается значительно выше истинного уровня глюкозы, что относится к недостаткам этих методов детекции концентрации глюкозы. Наиболее специфичными и точными методами количественного определения глюкозы в крови являются колориметрические. В зависимости от химической природы аналитической реакции эти методы могут быть подразделены на ферментативные и неферментативные. Гораздо шире используются энзимные методы (в частности глюкозооксидазный), благодаря применению которых увеличивается специфичность метода. Неферментативные методы определения концентрации глюкозы в крови состоят в образовании окрашенных соединений, вследствие, либо ее способности восстанавливать некоторые химические вещества, либо свойству давать с определенными реактивами цветные комплексы, поглощающие свет в видимой области спектра. К последним относят ортотолуидиновый метод, достаточно точный и быстрый, позволяющий определить содержание истинной глюкозы.
4. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
4.1. Количественное определение сахара в крови по методу Хагедорна-Йенсена
Принцип метода заключается в том, что в безбелковом фильтрате крови глюкозу окисляют железосинеродистым калием. Избыток последнего, не вступивший в реакцию с глюкозой, восстанавливают йодистым калием до свободного йода, который титруют гипосульфитом натрия. Количество сахара в крови вычисляют по данным титрования с помощью таблицы.
Ход работы
4.1.1. Приготовление гидроокиси цинка для осаждения белков. В 2 пронумерованные пробирки наливают по 5 мл 0,45% раствора сернокислого цинка и по 1 мл 0,1N раствора NaOH. Образуется студенистый осадок гидроокиси цинка.
4.1.2. Осаждение белка. 0,1 мл крови набирают микропипеткой и погружают пипетку до дна первой пробирки с гидроокисью цинка (опытной), осторожно выдувают кровь и промывают пипетку путем втягивания и выдувания жидкости. После чего тщательно перемешивают содержимое пробирки. Во вторую пробирку кровь не добавляют; она служит для контроля чистоты употребляемых реактивов. Обе пробирки ставят в кипящую водяную баню на 3 минуты и по истечении указанного времени их вынимают, охлаждают и фильтруют через небольшие кусочки ваты в пронумерованные сахарные стаканчики. После этого промывают вату 1 мл горячей дистиллированной воды и промывные воды переносят в те же стаканчики. Промывание повторяют три раза. Новую промывную воду наносят на ватный фильтр только после того, как профильтруется предыдущая.
4.1.3. Окисление глюкозы железосинеродистым калием. К фильтрату в каждый стаканчик приливают по 2 мл 0,05N раствора железосинеродистого калия. Стаканчики погружают в кипящую водяную баню на 15 минут для окисления глюкозы, после чего вынимают и охлаждают в бане с холодной водой.
4.1.4. Определение избытка железосинеродистого калия. В стаканчики наливают по 3 мл тройного раствора, содержащего йодистый калий, и по 2 мл 3% раствора уксусной кислоты. Жидкость приобретает желтую окраску вследствие появления свободного йода, который образуется в результате взаимодействия йодистого калия с избытком железосинеродистого калия.
Выделившийся йод титруют 0,05N раствором гипосульфита в присутствии 1-2 капель 1% раствора крахмала. Титрование производят медленно до обесцвечивания синей окраски жидкости. Чем больше сахара в крови, чем меньше будет избыток железосинеродистого калия, тем меньше выделится йода и тем меньше гипосульфита будет израсходовано на титрование (обратное титрование). В контрольной пробе, где сахара нет, а возможно только присутствие других редуцирующих веществ, на титрование должно пойти около 2 мл гипосульфита.
Результаты титрования записывают в таблицу.
При вычислении содержания сахара в исследуемой крови находят число, соответствующее количеству сахара в пробе (т.е. в 0,1 мл крови), выраженное в мг. Из количества сахара, найденного в опытной пробе, вычитают количество редуцирующих веществ, обнаруживаемое в контрольной пробе. Для определения содержания сахара крови в мг % полученный результат умножают на 1000. Для перехода от мг % к ммоль/л найденное значение умножают на 10 и делят на 180 (молекулярный вес глюкозы).
Определение сахара имеет важное клиническое значение, особенно при профессиональных заболеваниях, так как его количество в крови характеризует состояние углеводного обмена, функцию эндокринных желез, ЦНС, печени. Уровень сахара в крови, при котором он появляется во вторичной моче, называется почечным порогом (для глюкозы он равен 8,9 ммоль/л). При изучении концентрации глюкозы в крови или плазме пациента следует иметь в виду, что накануне этой процедуры пациент не должен принимать пищу во избежание пищевой (алиментарной) гипергликемии.
Увеличение концентрации глюкозы в крови (гипергликемия) наблюдается обычно при следующих состояниях:
1) сахарный диабет, острый панкреатит, панкреатические циррозы; эти заболеванияобусловливают появление гипергликемии, связанной с недостатком инсулина в организме;
2) токсическое, травматическое и механическое раздражение центральной нервной системы; травмы, опухоли мозга, а также менингит, эпилепсия, отравление окисью углерода, синильной кислотой, эфиром, ртутью обусловливают так называемую центральную (нервную) гипергликемию;
3) усиление гормональной деятельности щитовидной железы, коры и мозгового слоя надпочечников, гипофиза;
4) обильный прием углеводов с пищей (алиментарная гипергликемия);
5) сильные эмоции и психическое возбуждение.
5. СОСТАВЛЕНИЕ ОТЧЕТА Отчет составляется с указанием цели, задания, включает уравнения протекания реакций, экспериментальные данные и выводы.ЗАГАЛЬНІ ПОЛОЖЕННЯ
Курсова робота виконується студентами відповідно до навчального плану і є однією з форм навчальної роботи, її виконання повинно сприяти поглибленню засвоєння змісту курсу і придбанню навичок самостійної роботи з тактичної підготовки.
Написанню курсової роботи повинно передувати глибоке вивчення бойових статутів підручників і методичних матеріалів, літературних джерел.
Обов'язковою умовою написання роботи є використання практичних матеріалів що дозволить студенту ув'язати теорію і практику рішення задач поставлених у курсовій роботі.
Курсова робота з дисципліни “Тактична підготовка” є самостійною навчальною і дослідницькою роботою і розрахована на закріплення знань, отриманих студентами за даним курсом і по суміжних дисциплінах.
У дійсних "Указівках... " визначені мети, тематика, обсяг, структура і зміст курсової роботи, вимоги до неї, а також порядок виконання, оформлення і захисти.
Дата добавления: 2014-12-15; просмотров: 31 | Поможем написать вашу работу | Нарушение авторских прав |