Гельминтоовоскопические исследования производятся с целью обнаружения в фекалиях яиц паразитических червей. К настоящему времени известно весьма большое количество различных методов гельминтоовоскопических исследований, из числа которых нами будут описаны лишь наиболее эффективные и получившие широкое применение в ветеринарно-гельминтологической практике. Существующие методы гельминтоовоскопических исследований подразделяются на: а) качественные методы исследования, дающие возможность выявить, какими видами гельминтов заражено животное, и б) количественные методы исследования, дающие возможности судить о степени заражения животных теми или иными видами паразитических червей.
Методы всплывания. Методы всплывания, или так называемые флотационные методы гельминтоовоскопических исследований, основаны на применении для разведения фекалий жидкостей более высокого удельного веса, чем яйца гельминтов.
Метод Фюллеборна. Благодаря своей простоте и высокой эффективности приобрел наибольшее распространение в ветеринарно-гельминтологической практике. Этот метод позволяет улавливать яйца большинства видов нематод и некоторых цестод, но он является малоэффективным для обнаружения яиц трематод и акантоцефалов, удельный вес которых выше удельного веса насыщенного раствора поваренной соли.
Техника проведения метода Фюллеборна состоит в следующем. Приготовляют насыщенный раствор поваренной соли (столовой), для чего прибавляют в кастрюлю с кипящей водой такое количество соли, чтобы получить нерастворимый осадок. Раствор фильтруют через воронку со слоем марли или ваты в особый сосуд (бутылку). Отфильтрованному раствору дают остыть. Выпадение в осадок кристаллов соли после охлаждения раствора указывает на то, что насыщенный раствор поваренной соли приготовлен правильно. Удельный вес такого раствора равен 1,180.
Затем наливают в обыкновенный стакан этот насыщенный солевой раствор и размешивают в нем некоторую часть каловых масс (на 20 частей раствора берут 1часть испражнений). Насыщенный раствор соли прибавляют к каловым массам постепенно, а экскременты следует все время тщательно перемешивать. Когда стакан наполнен доверху, немедленно снимают палочкой все всплывшие крупные частицы испражнений, а смесь фильтруют через металлическое сито или марлю в другой стакан и оставляют стоять в течение получаса или часа. Большая часть яиц паразитических червей, удельный вес которых меньше, чем насыщенного раствора поваренной соли, всплывает в стакане на поверхность жидкости.
Для исследования берут из стакана каплю жидкости поверхностного слоя, прикасаясь к нему плашмя проволочной петлей диаметром от 5 мм до 1см.
Для снятия пленки многие рекомендуют пользоваться платиновой петлей, однако можно применять с таким же успехом и петлю из простой тонкой проволоки. После каждого исследования проволочную петлю прожигают на пламени горелки, чтобы не занести яйца паразитических червей в следующие порции анализ
Пленку жидкости, остающуюся на петле, с содержащимися в ней яйцами паразитических червей осторожно стряхивают на предметное стекло, покрывают покрывным стеклом и исследуют под микроскопом.
Для увеличения эффективности метода Фюллеборна некоторые исследователи вместо насыщенного раствора поваренной соли применяют насыщенные растворы гипосульфита, азотнокислого натрия, сернокислой магнезии, сахара, глицерина, уксуснокислого свинца, жидкого стекла и др., удельный вес которых выше, чем насыщенного раствора поваренной соли. Однако следует иметь в виду, что в жидкостях, имеющих слишком большой удельный вес, вместе с яйцами гельминтов будут подниматься различные посторонние частицы; кроме того, большая вязкость среды будет препятствовать быстрому всплыванию яиц.
Методы осаждения. Методы осаждения, применяемые при гельминтоовоскопических исследованиях, основаны на разведении фекалий в воде или в других жидкостях, удельный вес которых меньше, чем яйца гельминтов.
Метод последовательного промывания. Метод последовательного промывания применяется для диагностики фасциолеза жвачных, аляриоза плотоядных и других трематодозов, яйца возбудителей которых имеют большой удельный вес и не улавливаются методами всплывания.
Берут около 5 г фекалий и смешивают с десятикратным количеством воды. Смесь фильтруют через металлическое сито (или через марлю). Фильтрат отстаивают в течение 5 минут; верхний слой жидкости до самого осадка сливают. Осадок вновь смешивают с водой и отстаивают в течение 5 минут. Затем слой жидкости еще раз сливают, а осадок вновь смешивают с водой и опять отстаивают в течении 5 минут. Эти манипуляции проделывают до тех пор, пока верхний слой жидкости не станет прозрачным. После этого жидкость сливают, а осадок наносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом на наличие яиц трематод.
Метод последовательного промывания осадка после исследования по методу Фюллеборна. Учитывая, что флотационный метод Фюллеборна с насыщенным раствором поваренной соли имеет наиболее широкое распространение в ветеринарно-гельминтологических лабораториях России, и зная, что при применении этого метода на поверхность всплывают лишь наиболее легкие яйца нематод и некоторых цестод, а яйца трематод и акантоцефалов остаются в осадке, рекомендуется произвести дополнительное исследование осадка со дна. Для этого после применения обычного метода Фюллеборна всю жидкость из стаканчиков сливают, а осадок разбавляют водой, тщательно размешивают и фильтруют через металлическое сито или марлю. Фильтрат отстаивают в течение 5 минут; верхний слой жидкости до самого осадка сливают, а осадок подвергают повторным разбавлениям водой и отстаиваниям, как это указано в вышеизложенном методе последовательного промывания.
Дата добавления: 2014-12-20; просмотров: 184 | Поможем написать вашу работу | Нарушение авторских прав |