Читайте также:
|
1. Теоретическая часть:
1.1. Повторить теоретический материал по теме «Ферменты».
1.2. Рассказ преподавателя.
Щелочнаяфосфатаза – металлопротеин, содержится в разных тканях. В состав активного центра фермента входит атом цинка. Считают, что он повышает активность фермента, обеспечивая конформационные изменения и гидролиз моноэфиров ортофосфорной кислоты. Активность фермента возрастает в присутствии ионов магния и хлора. Буферные системы, используемые при определении ЩФ, можно разделить на инертные (барбиталовый, бикарбонатный буфер), ингибирующие (содержащие глицин, пропиламин) и активирующие (включающие в свой состав аминометилпропанол, диэтаноламин, ТРИС-буфер).
Содержится ЩФ в костной ткани, паренхиме и стенках желчных протоков печени, клетках слизистой оболочки кишечника, эпителии канальцев почек, плаценте и других тканях и органах.
Активность ЩФ обнаружена в большинстве биологических жидкостей, включая мочу, экскременты, желчь, слюну, молоко и лимфу.
Щелочная фосфатаза имеет изоформы; каждый изоэнзим сосредоточен в определенном органе. В организме человека три гена кодируют биосинтез фермента: один – печеночный, костный и почечный изоферменты, другой – кишечный изофермент, третий – плацентарную ЩФ. Считают, что в жировой ткани есть изофермент ЩФ.
В норме у взрослых людей в плазме (сыворотке) крови обнаруживается лишь ЩФ печеночного происхождения. У детей в сыворотке крови содержится значительное количество костной ЩФ; в небольшом количестве она может встречаться у юношей до 25 лет. После окончания формирования скелета присутствие её в сыворотке крови свидетельствует о наличии в организме доброкачественных или злокачественных остеопатий.
В последнее время особое внимание онкологов привлекают изоферменты ЩФ, используемые как маркеры онкологических заболеваний: плацентарный, плацентарноподобный, образованные как в злокачественных опухолях, так и в сыворотке.
Внедрение в клиническую биохимию техники определения с использованием моноклональных антител дало возможность разработать метод, позволяющий специфически выявлять отдельные изоферменты ЩФ. Радиоиммунологические исследования с применением моноклональных антител позволяет надежно обнаруживать в крови маркеры новообразований. Несмотря на высокую специфичность, эти методы пока не находят должного широкого применения в диагностике заболеваний вследствие высокой стоимости оборудования и тест-систем.
2. Указания к занятию:
2.1. Внимательно изучите инструкцию.
2.2. Приготовьте рабочие растворы для биохимического исследования активности ЩФ в сыворотке крови.
2.3. Осмыслить ход выполнения лабораторной работы.
2.4. Соблюдайте меры предосторожности в работе с реактивами, приборами.
2.5. При работе с пипетками используйте резиновую грушу с переходником. Работайте в перчатках!
Дата добавления: 2015-09-11; просмотров: 18 | Поможем написать вашу работу | Нарушение авторских прав |