Главная страница | Контакты | Случайная страница Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Определение влажности свежепроросшего солода

Влажность свежепроросшего солода анализируется ускоренным методом Чижовой аналогично зерну (см. лабораторную работу № 1). Для анализа используют навеску 5 г неизмельченного свежепроросшего солода и высушивают ее 10 мин. Расчет проводят по формуле 1.1

3.3.3 Определение амилолитической активности солода

Амилолитическую активность определяют колориметрическим методом. АС характеризует способность ферментов солода катализировать расщепление крахмала в основном на декстрины с небольшим количеством олигосахаридов. Активность солода характеризуется числом единиц АС, содержащихся в 2 г исследуемого солода. За единицу АС принимают такое количество фермента, которое в строго определенных условиях (1 ч при 30 ⁰С) катализирует гидролиз 1 г растворимого крахмала до декстринов различной молекулярной массы.

Приборы и оборудование: весы технические, термостат, мясорубка, фотоэлектроколориметр.

Посуда и материалы: стакан стеклянный для взвешивания, мерная колба вместимостью 100 см³ – 2 шт., фильтровальная бумага, воронка стеклянная, колба вместимостью 100-150 см³ – 3 шт., пипетки на 50, 10, 5, 1 см³, пробирки– 2 шт.

Реактивы: фосфатный буфер с рН 4,8-4,9 (готовят из двух растворов: 11,876 г Na₂HPO₄*2H₂О в 1 дм³ дистиллированной воды и 9,078 г KH₂PO₄ в 1 дм³ дистиллированной воды; берут 100 см³ второго раствора и добавляя около 1 см³ первого доводят на рН-метре до значения рН 4,8-4,9) – 100 см³; забуференный 1 %-ный раствор крахмала (1 г растворимого картофельного крахмала помещают в мерную колбу на 100 см³, добавляют 30-40 см³ воды, перемешивают, нагревают в кипящей водяной бане до полного растворения крахмала, охлаждают и добавляют 10 см³ фосфатного буфера и доводят водой до метки) – 20 см³; раствор йода в соляной кислоте концентрацией 0,1 моль/дм³ (готовят из основного раствора йода: 0,5 г йода и 5 г йодида калия в 200 см³. 2 см³ основного раствора доводят в колбе на 100 см³ раствором соляной кислоты концентрацией 0,1 моль/дм³)– 100 см³.

Расход сырья: свежепроросший солод - 10 г

Техника определения

Свежепроросший солод измельчают на мясорубке. Для определения АС просяного солода берут навеску 10 г, овсяного, ржаного, ячменного – 5 г в мерную колбу на 100 см³, заливают 10 см³ фосфатного буфера с рН 4,8-4,9 и доводят до метки дистиллированной водой. Полученную вытяжку выдерживают в термостате 1 ч при температуре 30 ⁰С, периодически помешивая. Затем фильтруют и фильтрат используют в качестве основного раствора. Рабочий раствор готовят путем разбавления основного раствора согласно таблице 3.1.

Таблица 3.1 – Приготовление рабочих растворов солода

В 2 пробирки наливают по 10 см³ субстрата (забуференный 1 %-ный раствор крахмала) и выдерживают в термостате при температуре 30 ⁰С в течение 10 мин. Затем, не вынимая пробирок, в первую наливают 5 см³ дистиллированной воды (контроль), во вторую – 5 см³ рабочего раствора фермента (опыт), предварительного нагретого до 30 ⁰С. Смеси перемешивают и выдерживают в термостате 10 мин. После этого пробирки вынимают из термостата, отбирают от контрольного и опытного образца по 0,5 см³ и переносят в колбы, в которые предварительно наливают по 50 см³ рабочего раствора йода в соляной кислоте концентрацией 0,1 моль/дм³. Смесь перемешивают.

Под действием HCl происходит инактивация ферментов и йодкрахмальная реакция. В результате этого растворы окрашиваются: контрольный – в синий цвет, опытный – фиолетово-бурый различных оттенков в зависимости от количества гидролизованного крахмала.

Оптическую плотность окрашенных растворов определяют колориметрированием при длине волны 630-670 нм (красный светофильтр) в кюветах с толщиной грани 10 мм. Колориметрирование проводят в сравнении с водой. Количество прогидролизованного крахмала (С) определяют по уравнению 3.3.

(3.3)

где: Д₁ и Д₂ – оптическая плотность контрольного и опытного образца,

соответственно;

0,1 – масса крахмала, взятого на анализ, г.

Если количество прогидролизованного крахмала меньше 0,2 или больше 0,7, то анализ повторяют, готовя, соответственно, рабочий раствор с большим или меньшим количеством основного раствора.

Амилолитическую активность ферментов солода рассчитывают по формуле 3.4.

(3.4)

где: 6,889 и 0,02939 – коэффициенты, полученные экспериментальным

путем;

С – количество прогидролизованного крахмала, г;

а – масса солода в реакционной смеси, мг (значение берется из

табл.3.1)