Читайте также:
|
Теперь для иллюстрации целесообразно привести некоторые
примеры, отнюдь не отражающие всего безграничного разнооб-
разия приложений электрофореза белков, даже в его простей-
шем, только что рассмотренном варианте.
Обзорный клинический анализ белков сыворотки человека. В приборе с
горизонтальным гелем (типа «Мультифор») одновременно можно обследовать
сыворотку крови 20 пациентов. Условия разделения: гель указанных выше
размеров, T = 3,5, С = 2,6; 0,1 М Трис-глициновый буфер, рН 8,9; напряжен-
ность поля 15 В/см, сила тока 45 мА; температура охлаждающей воды 10°;
преэлектрофорез в течение 30 мин при силе тока 60 мА. Препараты сыворотки
разбавляют в отношении 1: 3 тем же буфером, разведенным в 10 раз. Объем
каждого препарата 5 мкл. В первые 10 мин электрофореза силу тока снижа-
ют до 20 мА. Скорость миграции бромфенолового синего 4,5 см/ч; общая про-
должительность электрофореза 1,3 ч. На рис. 17, A сопоставлены картины
фракционирования белков сыворотки 10 пациентов с различными заболева-
ниями (по два препарата от каждого). Крайние слева и справа пары треков
содержат сыворотку нормальных доноров. Направление миграции белков —
снизу вверх. Интенсивные пятна вверху — низкомолекулярные компоненты
сыворотки.
Заметно лучше, особенно в области крупных белков, те же препараты
разделяются в более концентрированном геле (T = 7,5; С = 2,6), однако в этом
случае часть наиболее крупных белков выпадает в осадок на границе геля
(рис. 17, Б). Скорость миграции бромфенолового синего 1,8 см/ч при рабочей
силе тока 40 мА; продолжительность разделения 2,8 ч [Fehrnström, Moberg,
1977].
Дата добавления: 2015-09-11; просмотров: 79 | Поможем написать вашу работу | Нарушение авторских прав |