Главная страница | Контакты | Случайная страница Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Получение аминокислот.

1. Замещение галогена на аминогруппу в соответствующих галогензамещенных кислотах:

2. Присоединение аммиака к α,β-непредельным кислотам с образованием β-аминокислот:

CH₂=CH–COOH + NH₃ H₂N–CH₂–CH₂–COOH

3. Восстановление нитрозамещенных карбоновых кислот (применяется обычно для получения ароматических аминокислот):

O₂N–C₆H₄–COOH + 3H₂ H₂N–C₆H₄–COOH + 2H₂O

4. Биотехнологический способ получения чистых α-аминокислот в виде индивидуальных оптических изомеров. Этот способ основан на способности специальных микроорганизмов вырабатывать в питательной среде определенную аминокислоту.

В зависимости от взаимного расположения аминокарбоксигрупп различают a,b,g,s и др. аминокислоты, из них наиболее распространены a, b, и g. a-аминокислоты, L-конфигурации – важнейшие составные части пептидов и белков. Для качественного и количественного определения аминокислот используют гель-фильтрацию, бумажную, тонкослойную, ионообменную и ВЭЖХ хроматографию (аминокислотный анализатор), а также электрофорез.

Эти же методы применимы и при установлении аминокислотной последовательности в пептидах и белках.

Все аминокислоты, при низком значении рН, проявляют свойства кислот, при высоком – оснований, а в изоэлектрической точке- как цвиттер ион. В связи с этим аминокислоты являются амфолитами.

Кислота цвиттер ион биполярный ион основание

Все аминокислоты растворимы в кислых и щелочных растворах из-за образования солей (около изоэлектрической точки растворимость ничтожно мала), в спиртах, водноорганических растворителях.

Аминокислоты с циклическими фрагментами (фенилаланин, гистидин, триптофан, пролин и др.) отличает высокое отрицательное значение удельного вращения.

Для качественного обнаружения многообразия аминокислот нет строго специфичной реакций.

Пептиды бывают линейные и циклические, гомо- и гетеро-. В растениях чаще всего, встречаются олигопептиды.

7. Качественный анализ:

Добавляют 1-3 капли 0.1-1% спиртового раствора нингидрина, появляется различное, от желтого до фиолетового, окрашивание (аминокислоты, аминосахара, алкалоиды, первичные и вторичные амины); фиолетовое окрашивание различных оттенков специфично для a-аминокислот.

Добавляют 1-2 мл раствора натрия нитрита в кислоте соляной или уксусной, появляется различное окрашивание или окрашивание с выделением паров азота (аминокислоты с первичной и вторичной аминогруппой).

Добавляют 1-2 мг резорцина и 5 капель кислоты серной концентрированной, нагревают до появления зелено-коричневого окрашивания. Затем добавляют 5 мл воды и 5 мл раствора аммиака, появляются красно-фиолетовое окрашивание, иногда с зеленой флюоресценцией.

Добавляют 1-3 мл 10% раствора кислоты хлороводородной, 1-3 капли 0.1 М раствора натрия нитрита, перемешивают, затем добавляют 1-3 мл щелочного раствора b-нафтола, появляются вишнего-красное окрашивание или выпадает осадок от оранжевого до красного цвета (аминокислоты ароматические, амины ароматические).

Добавляют 2-3 капли реактива Фелинга (раствор I- 34.66 г меди сульфата растворяют в воде, подкисленной 2-3 каплями кислоты серной разведенной и доводят объем водой до 500 мл. Раствор II- 173 г сегнетовой соли и 50 г натра едкого растворяют в 400 мл воды и после охлаждения доводят объем водой до 500 мл. Реактивом служит смесь равных объемов растворов I и II, 5 мл реактива Фелинга разбавляют 5 мл воды, нагревают до кипения), появляются зеленое или бурое окрашивание (аминокислоты одно- и двухосновные).

Добавляют по каплям при встряхивании кислоту уксусную концентрированную или трихлоруксусную, наблюдается выпадение осадка, реже мути или хлопьев (белковые вещества, кроме желатина). При дальнейшем добавлении кислоты осадок белка растворяется.

Биуретовая реакция. Добавляют 1-2 мл раствора натра едкого концентрированного и 1 мл раствора меди сульфата, наблюдается яркое сине-фиолетовое окрашивание (белки, пептиды, белковые комплексы).

Ксантопротеиновая реакция. Добавляют 1 мл кислоты азотной концентрированной, появляются муть или белый осадок, цвет которого при нагревании меняется на ярко-желтый (ароматические аминокислоты, фенилаланин, тирозин, триптофан).