|
Читайте также: |
1. Анализ маркетинговой среды предприятия (фирмы).
2. Анализ влияния макросреды на маркетинг фирмы и рыночную ситуацию в целом
3. Информационное обеспечение маркетинга.
4. Эффективность маркетинговых исследований.
5. Комплексное исследование рынка как исходная функция системы маркетинга.
6. Стратегическое планирование маркетинга.
7. Разработка программы маркетинга (на примере отдельного товара).
8. Наблюдение как метод сбора маркетинговой информации.
9. Эксперимент как метод сбора маркетинговой информации.
10. Кабинетные исследования как метод сбора информации
11. Бюджет маркетинга и методы его планирования.
12. Разработка рыночной стратегии предприятия.
13. Конъюнктурный анализ рынка.
14. Стратегический анализ рынка.
15. Разработка и внедрение на рынок новых товаров.
16. Формирование товарной политики фирмы.
17. Цена в комплексе маркетинга.
18. Эффективность ценовой политики фирмы (предприятия).
19. Маркетинг на этапах жизненного цикла товара.
20. Маркетинговые исследования потребительского рынка.
21. Исследование емкости конкурентной среды потребительского рынка.
22. Исследование конкурентоспособности продукции в маркетинге.
23. Наступательные и оборонительные маркетинговые стратегии.
24. Мотивационный анализ поведения покупателей в маркетинге.
25. Методологические основы маркетинговых исследований потребителей.
26. Конкурентная борьба и основные методы изучения фирм-конкурентов.
27. Упаковка товара и ее роль в торговой политике.
28. Торговые марки и торговые знаки в маркетинге.
29. Формирование спроса и стимулирование сбыта в маркетинге.
30. Сравнительный анализ эффективности каналов сбыта.
31. Прямой маркетинг в сбытовой политике фирмы.
32. Разработка политики товародвижения в маркетинговой деятельности.
33. Исследование отношения индивидуальных потребителей к фирме.
34. Экспертные методы получения маркетинговой информации.
35. Оценка собственного потенциала фирмы и ее конкурентоспособности.
36. Электронный маркетинг.
37. Изучение и прогнозирование покупательского спроса.
38. Реклама в системе маркетинговых коммуникаций.
39. Оценка эффективности рекламы.
40. Связи с общественностью в системе маркетинговых коммуникаций.
41. Фирменный стиль в маркетинге.
42. Анализ рекламы продукции отечественных или зарубежных фирм на российском телевидении.
43. Анализ рекламы продукции отечественных или зарубежных фирм в сети Интернет.
44. Анализ масштаба и потенциала рынка.
45. Фокус-группы в маркетинговом исследовании.
46. Контроль маркетинговой деятельности на предприятии.
47. Маркетинговые исследования бренда.
48. Маркетинговые исследования потребителей корпоративного рынка.
49. Маркетинговое исследование жизненного цикла продукта.
50. Определение системы оценочных ориентиров, характеризующих деятельность фирмы, и их важности для потребителей.
ВВЕДЕНИЕ.
Вирусы выделены отдельно в "царство" VIRA. Они отличаются от других микробов по следующим признакам:
1) Вирус не имеет клеточную структуру.
2) Содержит лишь одну нуклеиновую кислоту (ДНК или РНК).
3) Не способен к синтезу белка.
Является внутриклеточным паразитам, поэтому не размножается на искусственных питательных средах
4) Не способен к росту.
5) Имеет дисьюнктивный (разобщенный) способ репродукции, т.е. отдельные части вириона репродукцируются в разных частях клетки и в разное время
6) Не имеет своей энергетической системы
7) Многие вирусы не имеют ферментных систем
8) Многие вирусы существуют без липидов и углеводов
9) Для репродукции вирусы используют рибосомы, ферменты, АТФ, транспортную РНК, аминокислоты, мембраны клетки.
Размеры вирусов колеблются от 15-20 до 300-500 нм. Поэтому они проходят через мелкопористые фильтры и не видны в световом микроскопе. Для их обнаружения используется электронный микроскоп. При некоторых вирусных заболеваниях под иммерсионным микроскопом обнаруживаются внутриклеточные включения (при оспе - тельца Гварниери, при бешенстве - тельца Бабеша-Негри). Кроме того, в материале из оспенных высыпаний можно обнаружить элементарные частицы Пашена.
Вирусы могут существовать в двух формах; внеклеточной и внутриклеточной. Внеклеточная форма существования вируса называется вирионом. Это инертное состояние вирусной частицы, предназначенной для сохранения и передачи вирусной генетической информации.
Внутриклеточная форма существования - вегетативная форма, предназначенная для репродукции вируса в клетке.
Вирион устроен следующим образом: в центре располагается нуклеиновая кислота (ДНК или РНК), вокруг которой находится белковая оболочка - капсид. Нуклеиновая кислота и капсид составляют нуклеокапсид. Большинство вирусов состоят только из нуклеокапсида. Это просто устроенные вирусы. Некоторые вирусы имеют поверх капсида суперкапсидную оболочку (пеплос), в состав которой, кроме белков, входят липиды и углеводы.
Структурные элементы капсида — капсомеры уложены у разных вирусов по-разному: имеется спиральный, кубический, смешанный тип симметрии.
Просто устроенные вирусы со спиральным типом симметрии имеют палочковидную и нитевидную форму. С кубическим типом симметрии - форма многогранника: тетраэдра, октаэдра, или чаще икосаэдра.
Сложно устроенные вирусы имеют сферическую, конусовидную, пулевидную и другие формы.
Вирусы играют большую роль в патологии человека, животных, растений, микроорганизмов, вызывая более 90% всех инфекционных заболеваний у людей (грипп, парагрипп, корь, эпидемический паротит, бешенство, полиомиелит, гепатиты, энцефалиты, желтую лихорадку, СПИД, аденовирусные заболевания, оспу, герпес и другие).
Неклеточную структуру имеют также вироиды и прионы.
Вироиды - содержат только РНК, аналогичную транспортной РНК клетки, не содержат белка и других веществ. Они вызывают заболевания растений (низкорослост хризонтем, бугорчатое заболевание картофеля и другие).
Прионы - инфекционные белковые частицы. Они не содержат нуклеиновой кислоты. Вызывают медленные инфекции у людей и животных (куру, болезнь Крейцфельда-Якоба, скрепи и другие).
Лабораторная диагностика вирусных инфекций
Лабораторная диагностика вирусных инфекций базируется на обнаружении вируса или его компонентов и выявлении нарастания титра антител к возбудителю у больных.
Источником выделения вируса служат кровь; спинно-мозговая жидкость; моча; смывы из носоглотки; отделяемое носоглотки; коньюктизы; фекалии, содержимое везикул; секционный материал.
Взятый материал помещают в пробирки или флаконы с завинчивающимися пробками, которые заворачивают в полиэтиленовые пакеты, маркируют и в замороженном состоянии доставляют в лабораторию для исследования. Для изучения нарастания титра антител надо иметь 2-3 пробы крови, из которых первая должна быть взята не позже 4 дня болезни, а вторая и третья - соответственно через 2 и 4 недели. Сыворотку лучше хранить в охлажденном (+4°С) или замороженном состоянии (-20-40°С).
В большинстве случаев концентрация вируса в клиническом материале недостаточная для прямого обнаружения вируса или антигена и тогда приходится прибегать к выделению вируса на чувствительных клетках и организмах с последующей его идентификацией.
Культивирования на животных. Чаще всего используют новорожденных животных как более чувствительную модель – (белых мышей, крыс, хомяков, обезьян и других).
О наличии вируса в организме чувствительных животных судят по клиническим проявлениям, гистологическим исследованием, наличию внутриклеточных включений (тельца Бабеша-Негри при бешенстве), гемаглютинации и другим реакциям.
Культивирование в курином эмбрионе. Куриные эмбрионы используют для культивирования ряда вирусов (гриппа, парагриппа, оспы и других). Чаще всего о размножении вируса судят по гибели эмбриона, образовании на хорионаллантоисной оболочке различных включений (вирус оспы), по реакции гемагглютинации (вирус гриппа).
Культивирование в культурах клеток и тканей. В настоящее время является одной из основных биологических моделей при изучении вирусов. Преимущество метода состоит в том, что почти к каждому вирусу можно подобрать чувствительную клетку или ткань, создать стандартные условия.
В вирусологической практике используют следующие типы культур клеток и тканей:
I. - Культуры переживающих эксплантанты ткани - Для выделения вируса материалом от больных заражают тканевые эксплантанты - кусочки органов, выращиваемых на питательной среде, поддерживающей структуру и жизнедеятельность функциональных клеток (например трахея эмбриона человека - короновируса).
II. - Культуры растущих тканей (первичные, перевиваемые, диплоидные)
1. Первичные (свежие клетки) готовятся все время заново путем ферментативного расщепления трипсином органов и дальнейшему субкультивированию не подвергаются (куриные фибробласты).
2. Перевиваемые - могут, по-видимому, неограниченно размножаться, они имеют одинаковую форму клеток, стабильный в условиях.
Их получают из нормальных эмбриональных тканей (СПЭВ-) - почки эмбриона свиньи и др. и из злокачественно перерожденных тканей (HeLa, Hep - 2 и др.)
3. Диплоидные - содержат диплоидный набор хромосом. В течение 40 пассажей их кариотип остается неизменным (-38), поэтому их чаще всего используют при производстве противовирусной вакцины. Ш-суспензионные культуры растущих клеток. Кусочки ткани, взятые у больного при биопсии, трипсинизируют и клеточную взвесь выращивают вместе с чувствительными перевиваемыми клетками в однослойной культуре (например вирус зостер).
В зависимости от свойств вируса и типа зараженных клеток исходом взаимодействия вируса с клеткой могут быть следующие изменения культур клеток:
Цитопатоическое действие (ЦПД) - развитие дегенеративных процессов в клетках. Дегенерация клеток носит разный характер в зависимости от репродуцирующегося вируса. Например: мелкозернистая деструкция, округление клеток - вирус полиомиелита.
Образование симпластов - гигантских многоядерных клеток в результате слияния цитоплазмы нескольких клеток. Например: вирус кори, респираторно-синцитиальный вирус.
Образование включений - одно из проявлений ЦПД. Включения могут формироваться как в цитоплазме (вирус оспы), так и в ядрах клеток (аденовирусы).
Образование бляшек - одно из проявлений ЦПД. Для их выявления монослой клеток после заражения материалом покрывают слоем агара, в котором находится витальная краска. Эта краска не окрашивает локальные участки дегенерированных клеток, возникших в результате воздействия вируса. Определение изменений в культуре клеток под действием вируса можно провести по цветной пробе. При росте и размножении клеток, в которых вирус не вызывает ЦПД, изменяется цвет среды в результате снижения pH, если вирус оказывает ЦПД - то цвет среды не изменяется. При размножении некоторых вирусов (например вируса гриппа) в культуре клеток последние приобретают способность адсорбировать на себе эритроциты - гемадсорбция.
Воспроизведение инфекции у лабораторных животных, цитопатический эффект в культурах клеток, феномены гемадсорбции и гемагглютинации являются лишь косвенными показателями выделения вируса, помогающими выбрать дальнейший путь его идентификации. Окончательное типирование достигается применением комплекса серологических методов.
С этой целью используют РСК, РБН, РТГА, РИФ, ИФМ, РИМ, реакцию диффузной преципитации в агаре (РДПА).
Реакция биологической нейтрализации (РБН). Основана на нейтрализации антителами инфекционных свойств вирионов.
Смесь специфической сыворотки с вирусом вводят чувствительным животным или заражают культуры клеток. Нейтрализующий эффект определяют в культуре клеток методом бляшек или по цветной пробе.
Реакция торможения гемагглютинации. Многие вирусы обладают способностью агглютинировать эритроциты. В присутствии иммунной сыворотки агглютинация прекращается благодаря блокировке ответственного за этот феномен антигена гемагглютинина.
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Комплекс антиген - антитело выявляется с помощью антител, меченных флюоресцирующими красителями. Используют как прямой, так и непрямой метод флюоресцирующих антител.
Ускоренная диагностика вирусных инфекций: используют такие методы как электронная и иммунная электронная микроскопия, РИФ, ИФМ, РИМ, РНГА. Для обнаружения антител исследуют совместно парные сыворотки, начиная с разведения 1: 10. Показателем свежеперенесенной инфекции является не менее, чем четырехкратное нарастание титра антител во второй сыворотке. Для этого используют также серологические реакции как pH, РТГА, РСК, РИФ, ИФМ, РИМ, РИГА и другие.
Особенности работы в вирусологической лаборатории.
Работа в вирусологической лаборатории проводится аналогично работе в бактерилогической с учетом специфики работы при выращивании клеточных и тканевых культур.
Цель занятия: изучить особенности вирусов, их морфологию, архитектуру. Ознакомиться с методами лабораторной диагностики вирусных инфекций.
Мотивационная характеристика темы:
Вирус играет большую роль в патологии человека, животных, вызывая
более 90% всех инфекционных заболеваний у людей (грипп, корь, полиомиелит, гепотиты, энцефалиты и другие). При постановке диагноза заболеваний, вызванных вирусами, важное значение имеет правильность выбранного метода лабораторной диагностики.
Студент должен знать: особенности вирусов, морфологии, архитектуру их, лабораторную диагностику вирусных инфекций.
Студент должен уметь: проводить взятые материалы для вирусологического исследования (мокрота, гной, кровь, мазок из зева, кал).
Студент должен иметь навыки: соблюдения правил противоэпидемического режима и техники безопасности микробиологической лаборатории;
- обеззараживания инфекционного материала антисептической обработки рук, контаминированных исследуемым материалом;
- микроскопии;
- заполнения бланков направлений для вирусологических исследований, учет результатов лабораторных исследований (приложение).
Оснащение занятия.
1. Таблицы: 1. Морфология вирусов, 2. Строение вириона. 3.Типы симметрии. 4. Вирус набуральной оспы. 5. Вирус бешенства, 6. Строение куриного эмбриона. 7. Типы культуры клеток. 8. Обнаружение вируса в культуре клеток.
2. Демонстрация: Питательные среды (Хенкса, Игла 199); используемые при вирусологических исследованиях; культура клеток (пробирка).
Для самостоятельной работы:
На рабочее место: 1.) пробирку с вируссодержащим материалом; 2.) Мышь. 3) Куриный эмбрион, 4) Шприц с иглой (стерильные); 5) Шило или остроконечные ножницы; 6) Банку или эксикатор, вату и эфир; 7) Парафин; 8) Клетка для мышей; 9) Овоскоп.
Дата добавления: 2014-12-20; просмотров: 47 | Поможем написать вашу работу | Нарушение авторских прав |
| <== предыдущая лекция | | | следующая лекция ==> |
| ТЕМАТИКА КУРСОВЫХ РАБОТ | | | СЕМИНАР №2 |