Главная страница | Контакты | Случайная страница Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Внутрикожные тесты

Внутрикожные тесты более чувствительны, чем скарифи­кационные, но менее специфичны. Применяют их, главным образом, для выявления сенсибилизации к аллергенамбакте­риального и грибкового происхождения. С неинфекционны­миаллергенами их проводят только в том случае, когда апп­ликационные или скарификационныетесты отрицательны или сомнительны, а анамнез четко положительный.

Обследованию с инфекционными аллергенами подлежат больные с подозрением на инфекционно-аллергическую форму бронхиальной астмы, крапивницу и т.д. Специфичес­кое обследование таких пациентов представляет определен­ные трудности в связи с тем, что основное заболевание часто имеет непрерывно рецидивирующее течение, а также в связи с наличием множественных очагов хронической инфекции.

Прежде чем приступить к аллергологическомуобследова­нию с инфекционными аллергенами, необходимо добиться ремиссии заболевания. С этой целью предварительно прово­дится санация очагов хронической инфекции.

Аллергия к инфекционным агентам и грибкам может про­текать по немедленному и замедленному типу, поэтому ре­зультат постановки проб оценивают через 20 мин. 24 ч и 48 ч. Кроме того, у части больных наблюдаются так на­зываемые отсроченные реакции (через 6-8 ч), которые также должныбыть учтены.

Внутрикожные пробы отличаются меньшей специфичнос­тью и довольно часто дают ложноположительные результаты, кроме того, они могут спровоцировать нежелательные ос­ложнения, поэтому количество аллергенов при внутрикожном тестировании не должно превышать 3-5.

• ложноположительный или ложноотрицательный резуль­тат при кожном тестировании;

• уртикарный дермографизм.

Основными преимуществами методов специфической ди­агностики in vitro являются:

• безопасность для больного;

• возможность проведения исследования в случае, когда па­циент находится от аллерголога на большом расстоянии и доставлена лишь сыворотка больного;

• недостаточное количество крови для исследования.

В клинической практике наиболее широко используются следующие методыспецифической диагностики, проводи­мые in vitro:

• метод иммуноферментного анализа (ИФА) для определе­ния специфических IgE;

• радиоаллергосорбентный тест (РАСТ) для выявления спе­цифических IgE);

• непрямой базофильныйтест (тест Шелли);

• прямой базофильный тест (тест Шелли);

• реакция специфического высвобождения гистамина из базофилов периферической крови больного (поP.Scov, S.Norne,B.Weeke),

ИФА, радиоаллергосорбентный тест, непрямой и прямой базофильные тесты являются вспомогательными методами специфической аллергодиагностики при реакциях немед­ленного типа.

Иммуноферментный анализ в настоящее время являет­ся одним из распространенных методов исследования. С по­мощьюИФА производится количественное определение аллергенспецифических IgE в крови больного.

Принцип метода заключается в том, что на первом этапе исследования испытуемыйаллерген ковалентно связывается с твердой фазой (бумажный диск, активированный полимер и др.).

Придобавлении сыворотки больного происходит связыва­ние аллергена, фиксированного на твердой фазе, с антите­лом, если в сыворотке присутствуют соответствующие данно­му аллергену антитела. После отмывания несвязавшихся IgE добавляются антитела против IgE, меченные флуорохромом(пероксидазой хрена, бета-галакгозидазой и др.). Происхо­дит образование комплекса: аллерген на твердой фазе + спе­цифический IgE + антитела анти-IgE (антитела против IgE). Несвязавшиеся антитела удаляются.

Уровни специфического IgE-связывания определяются по интенсивности свечения (реакция оценивается в интервале 1 -4 класса). Чем выше показатель свечения по отношению к негативномуконтролю (сыворотка, в которой отсутствуют специфические антитела), тем больше специфических IgЕ в сыворотке больного. Специфический характерреакции учитывается на основе позитивного контроля (IgE-связывание интенсивностью 4 класса). Ценность этого метода состо­ит в том, что для его проведения сразу с большим количест­вом аллергеновтребуется небольшое количество сыворотки.

Радиоаллергосорбентный тест (PACT)

С помощью этого метода также производится количествен­ное определение аллергенспецифических IgE в крови. Аллер­ген, соединенный ковалентно с бумажным диском, реагирует со специфическим IgE крови больного. После отмывания не­специфического IgE добавляют радиоактивно меченый (¹²^i) анти-IgE. Образуется комплекс специфический IgE + меченый анти-IgE. Радиоактивность этого комплекса измеря­ют с помощью гамма-счетчика. Чем больше радиоактивность, тем выше содержание специфического IgE в крови больного.

Для измерения общего и аллерген-специфических IgE ис­пользуют стандартные наборы (панели ) аллергенов.

Для определения IgE в сыворотках крови больных приме­няют методы, основанные на эффекте хемилюминесценции, Принцип постановки теста такой же, как и при ИФА и радио-аллергосорбентном тесте, однако в качестве индикатораре­акции используются фотореагенты (А, В, С, D), свечение кото­рых (тест MAST-CLA(Cll)) регистрируется на пленке Polaroid, на люминометре, на фотометре.

Специфические антигены обнаруживают при помощи ELISA-теста.

Для диагностики аллергических реакций, протекающих по механизмам гиперчувствительности замедленного действия, например при пищевой и лекарственной аллергии, применя­ют тест бласттрансформации лимфоцитов.

Конъюнктивальный провокационный тест п рименяютдля диагностики аллергическогоконъюнктивита и выяв­ления аллергенов, вызывающих его развитие.

Назальный провокационный тест применяют для диа­гностики аллергического ринита.

Ингаляционный провокационный тест обычнопри­меняют для выявления бронхиальной астмы, в основном с це­лью дифференциальной диагностики (бронхиальная астма, обструктивный бронхит и т.п.), только в фазе ремиссии в ста­ционарных условиях. Перед постановкой теста предвари­тельно регистрируют параметры функции внешнего дыха­ния (объем форсированного выдоха в течение первой секун­ды – OФВ 1, ФЖЕЛ, индекс Тиффно ). Исходный уро­вень ОФВ1 должен быть не менее 70% от должного значения.

Затем испытуемый вдыхает сначала контрольный раствор, а затем раствор аллергена, начиная с дозы минимальной кон­центрации, до той, которая даст заметную реакцию. Тест счи­тается положительным при снижении ФЖЕЛ и индекса Тиффно более чем на 20%.

Провокационный ингаляционный тест с карбахолином (ацетилхолином) используется для подтверждения диагноза бронхиальной астмы.

Провокационный ингаляционный тест с холодным возду­хом применяется для исследования неспецифической гипер­реактивности бронхов.

Подъязычный провокационный тест используется для диагностики пищевой и лекарственной аллергии. Аллер­ген наносится на слизистую оболочку подъязычнойобласти. При пищевой аллергии применяются натуральныепродукты в разведении 1:10, прилекарственной — 1/8-1/4 разовой до­зы растворенного вещества. Тест считается положительным при появлении в подъязычной области гиперемии, отека, зу­да, а такжепри учащениипульса, чиханье, кашле.

Для диагностики лекарственной аллергии применяется также тест торможения естественной эмиграции лейкоцитов (ТТЕЭЛ). Данный тест высокоспецифичен и безопасен.

Показания к применению ТТЕЭЛ in vivo:

• для специфической диагностики лекарственной аллер­гии у больных с указаниями в анамнезе на непереносимость медикаментов и показаниях к их применению;

• у больных с атопическими заболеваниями (бронхиальная астма, поллиноз, атопический дерматит) при показаниях к применению антибактериальных и других препаратов;

■ для подтверждения лекарственной аллергии в клинике профессиональных заболеваний.

Абсолютные противопоказания к применению ТТЕЭЛ in vivo:

• полное отсутствие зубов в полости рта;

• острая стадия воспалительных заболеваний в полости рта (острый парадонтит, ангина, стоматит и др.);

• острые аллергические заболевания.

Для исследования используются водорастворимые формы медикаментов. Начальная концентрация препарата - 1 мкг/мл. В один день можно проводить только одно исследо­вание с одним препаратом и одной его концентрацией. Про­ведение теста не рекомендуется па фоне приема антигистаминных и глюкокортикостероидных препаратов, иммунодепрессантов. Обследование рассчитано па 1,5 ч и состоит из 2 этапов. При подсчете лейкоцитарных клеток в собранном для исследования материале снижение числа лейкоцитов (нейтрофилов) более чем на 30% оценивается как положительный тест. Результаты теста фиксируются на специальном бланке, который вкладывается в историю болезни пациента.