Главная страница | Контакты | Случайная страница Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Влияние эмоционального стресса на клеточное, гуморальное и неспецифическое фагоцитарное звенья иммунитета на фоне тагансорбента

Как известно, различные неблагоприятные факторы окружающей среды, воздействующие на организм, приводят к напряжению адаптивных механизмов, в частности создают условия для чрезмерной отрицательной нагрузки для нервной системы, что приводит к психовегетативным расстройствам, приобретающем в дальнейшем психосоматический характер (Вейн А.М. с соавт.) /256/. В то же время, патогенетические механизмы влияния психоэмоционального стресса и других стрессовых факторов на иммунную систему и биохимические процессы, вызывающих иммунодефицитного состояния, изучены недостаточно.

Анализ данных литеpатуpы показывает о заинтеpесованности иммунитета

Поэтому одной из задач нашего исследования явилось изучение pеакции иммунной системы при эмоциональном стрессе.

Hесмотpя на значительное количество исследований, посвященных изучению иммунной системы пpи стpессе, многие аспекты иммунных наpу-шений остаются неpешенными. Также пpотивоpечивость опубликованных дан-ных не позволяет сделать опpеделенные заключения о патогенетическом значе-нии наpушений клеточного и гумоpального иммунитета пpи эмоциональном стpессе.

Для решения поставленных вопросов важно было подобрать адекватную модель стресса и провести ее периодизацию в приложении к эксперименту с учетом реактивности животных, выявить главные факторы, определяющие патогенез и его роль в дальнейшем развитии адаптационного синдрома. Для воспроизведения эмоционального стресса использовали модель Жетписбаева Б.А. с соавт. /236/ – «Способ воспроизведения стрессового состояния у мелких лабораторных животных» (Авторское свидетельство №25907 от 02.04. 1999).

Для изучения влияние эмоционального стресса на клеточное, гуморальное и неспецифическое фагоцитарное звенья иммунитета на фоне глинотерапии нами были выполнены 4 серии опытов на 95 белых беспородных половозрелых крысах массой 180+20 г. В 1-й интактной группе (n=10) и 2-й контрольной группе (n=45) изучали влияние эмоционального стресса на функциональное состояние иммунитета при эмоциональном стрессе (контрольные группы), опытную составили 3-я – (интактные+глинотерапия) и 4-я (стресс+ глинотера-пия) группы, которые за 10 дней до эксперимента принимали природную глину из расчета 4,0 мг. на 100 г. массы тела.

Во 2 и 4 группах эмоциональный стресс воспроизводили по предложенной методике Жетписбаева Б.А. с соавт. /236/. Реакцию иммунной системы изучали до и после стрессорного воздействия через 1, 2 и 3 сутки.

Из таблицы 2 видно, что в контрольной группе через 1 сутки после стрессорного воздействия число лейкоцитов в периферической крови достоверно возрастало на 49% от исходного, несколько снижалось на 2 сутки и возвращалось до исходного уровня на 3 сутки. Относительное и абсолютное количество лимфоцитов достоверно повышалось после стрессорного воздействия в 1.6 и 3,5 раза на 1 и 2 сутки соответственно и оставалось высоким до конца наблюдения (3 сутки)

Относительное содержание Т-общих лимфоцитов после стрессорного воздействия существенно не изменялось и оставалось на уровне исходных данных. Изучение же абсолютного числа Т-общих лимфоцитов после стрессорного воздействия показало их достоверное повышение на протяжении всего периода наблюдения.

Изучение субпопуляции Т-лимфоцитов в теофиллиновом тесте после стрессорного воздействия выявило достоверное повышение абсолютного содержания теофиллин устойчивых розеткообразующих клеток (ТФУ-РОК) в

течение 1 и 2 сутки, на 3 сутки их количество снизилось до исходного уровня. Относительные показатели ТФУ-РОК в периферической крови в течение первых 2 суток после стрессорного воздействия не отличались от исходных данных и достоверно снизились на 3 сутки.

Таблица 2

Показатели клеточного иммунитета при эмоциональном стрессе

Примечание: 1 - %; 2 – абс. числа; о – достоверно к исходному (Р<0,05)

оо – достоверно (Р<0,001)

Количественное содержание теофиллин чувствительных розеткообра-зующих клеток (ТФЧ-РОК), обогащенных клетками преимущественно с супрессорной активностью, после стрессорного воздействия достоверно повышалось через 1, 2 и 3 сутки в 2,1; 1,3 и 1,2 раза соответственно (Р<0,05). Относительные показатели содержания ТФЧ-РОК в периферической крови после стрессорного воздействия также достоверно повышались на всем протяжении эксперимента. Хелперно/супрессорный индекс после стрессорного воздействия изменялся волнообразно: снижался на 1 сутки (Р<0,05), временно повышался на 2 сутки и вновь снижался на 3 сутки (Р<0,05).

Функциональная активность Т-лимфоцитов изучалась по МИФ продуцирующей функции Т-клеток после стимуляции митогеном (ФГА). Анализ продукции МИФ в ответ на ФГА в эксперименте после стрессорного воздей-ствия показал, что уровень продукции лимфокина достоверно повышался в течение всего периода наблюдения. Так индекс миграции лейкоцитов через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия составили 0,50+0,01; 0,58+0,02 и 0,63+0,01 соответственно (Р<0,05).

Таким образом, изучение количественных показателей Т-лимфоцитов у животных после стрессорного воздействия выявило повышение их числа в первые 2 сутки, обусловленное повышением числа Т-клеток с хелперной и супрессорной активностью, что соответствует первой стадии общего адаптационного синдрома. Функциональная активность Т-эффекторов в ответ на ФГА, как и общее число лейкоцитов, максимально повышалась в течение первых 2 суток с тенденцией к снижению на 3 сутки после стрессорного воздействия.

Из гуморальных факторов иммунитета у контрольных животных в течение первых 3 суток после стрессорного воздействия нами изучены количественные показатели В-лимфоцитов в крови, содержание АТОК в селезенке, индекс супрессии (ИС) и уровень концентрации циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в периферической крови (таблица 3). Как следует из таблицы 3 относительное и абсолютное содержание В-лимфоцитов достоверно повышались уже через 1 сутки после стрессорного воздействия в 2,6 и 3,1 раза соответственно, снижались на 2 сутки до 10+1,5% и 587+23% (Р<0,05) в 1 мкл соответственно, оставаясь достоверно высоким по отношению к исходным данным, и вновь повышалась на 3 сутки после стрессорного воздействия до 25+3,1% и 1240+43 в 1 мкл (Р<0,001).

Таблица 3.

Показатели гуморального звена иммунитета при эмоциональном стрессе.

Примечание как и в таблице 2

Содержание АТОК в селезенке после стрессорного воздействия достоверно снижалось в сравнении с исходным показателем в течение всего периода наблюдения. Индекс супрессии (ИС) возрос через 1 и 2 сутки после стрессорного воздействия на 50% и 53% соответственно, через 3 сутки его значения достигло 66%.

Уровень концентрации ЦИК в периферической крови также достоверно снижался через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия, как и число АТОК в селезенке.

Таким образом, изучение гуморальных факторов иммунитета у животных после стрессорного воздействия через 1, 2 и 3 сутки показало разнонап-равленность их изменений. С одной стороны происходило снижение содержания АТОК в селезенке, уровня концентрации ЦИК в периферической крови, с другой стороны увеличение индекса супрессии и количества В-клеток в периферической крови. Это свидетельствует о компенсаторной реакции орга-низма на стрессорное воздействие с выбросом клеточного пула незрелых В-лимфоцитов и недостаточности гуморального иммунитета со снижением числа АТОК в селезенке и концентрации ЦИК в периферической крови.

Из неспецифических факторов иммунитета нами изучены фагоцитоз, фагоцитарное число и НСТ-тест у животных через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия (таблица 4). Как видно из таблицы через 1 сутки после стрессорного воздействия фагоцитоз увеличился в 2,1 раза (Р<0,05) и продолжал повышаться до 81+4,9% на 2 сутки, на 3 сутки отмечалось его относительное снижение, но при этом его значение оставалось достоверно выше исходного уровня.

Как и фагоцитоз фагоцитарное число было высоким на всем протяжении наблюдения; увеличивалось в 1,6; 1,4 и 1.3 раза соответственно в сравнении с исходными данными.

НСТ-тест спонтанный через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия также достоверно повышался до 17,6+0,77; 8,1+0,7 и 16,3+0,66 соответственно (Р<0,001).

Таблица 4

Показатели неспецифического звена иммунитета при эмоциональном стрессе

Примечание как и в таблице 2

Таким образом, результаты исследований фагоцитарной активности лейкоцитов в периферической крови через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия показывают повышение фагоцитарного числа, показателей НСТ-теста и процента фагоцитоза, что может быть связано с компенсаторной реакцией организма на стресс воздействие в виде «метаболического взрыва» в нейтрофилах и повышения неспецифического фагоцитарного звена иммунитета.

Изучение иммунологических показателей в динамике развития общего адаптационного синдрома при эмоциональном стрессе позволило выявить изменение функциональной активности клеточного, гуморального и неспеци-фического фагоцитарного звеньев иммунитета. Сопоставление полученных нами результатов с данными литературы о течении стресс-реакции /247, 1, 4, 5/ свидетельствуют о том, что несмотря на значительные различия в развитии постстрессорного состояния у людей и экспериментаьлных животных, имеют место и общие черты. Это позволило принять схему Г. Селье /35, 36/ и условно выделить три периода развития общего адаптационного синдрома. В каждом из этих периодов развития проведено комплексное исследование клеточных, гуморальных и неспецифической фагоцитарной звеньев имму-нитета, центральных и периферических лимфоидных органов, активности некоторых ферментов энергетического обмена в селезенке, печени и надпочечниках.

Проведенные нами экспериментальные работы на белых крысах показали, что при эмоциональном стрессе происходят выраженные и далеко неодно-значные нарушения звеньев иммунитета, их взаимосвязи, согласующиеся с расстройствами энергетического обмена в селезенке, печени и надпочечниках. Развитие вторичной иммунологической недостаточности реализовалась на уровне популяции лимфоидных клеток и определялась повышением клеточного и фагоцитарного звеньев иммунитета, угнетением его гуморального звена.

Изучение иммунологических показателей в динамике развития стресс-реакции позволило выявить изменение функциональной активности Т- и В-системы иммунитета. Исследование активности ферментов энергетического обмена дало возможность проследить развитие общего адаптационного синдрома при эмоциональном стрессе, что согласуется с литературными данными, полученными ранее другими авторами /4, 19/. До сих пор остаются многие принципиально важные аспекты проблемы эмоционального стресса: вызывает ли стрессорное воздействие угнетение защитно-приспособительных реакции организма или, наоборот, приводит ли их к мобилизации. Причины этих изменений обусловлены миграцией форменных элементов крови, как одно из проявлений защитно-компенсаторных механизмов. При эмоциональном стрессе в ранней стадии адаптационного синдрома повышается количество лейкоцитов, всех видов лимфоцитов и их субпопуляций с хелперной и, особенно, с супрессорной активностью, что выражается в снижении хелперно/супресорного индекса с 1,96+0,16 до 1,4+0,24 (Р<0.05), фагоцитарная активность нейтрофилов превышает контрольные показатели. Это явление отметили М.П. Блохин /257/ при травматическом шоке и Б.А. Жетписбаев /4/ при стрессе облученного организма.

Все звенья иммунитета вносят существенную лепту в развитии иммунных реакции и во многом зависят от факторов, влияющих на них. Результаты наших исследований показали, что развитие стресс-реакции сопровождаются дисфункциями в иммунной системе.

Установлено, что высокий уровень лимфокинпродуцирующей способности лейкоцитов, определяющих по снижению индекса миграции в РТМЛ на ФГА, отражает функциональную активность Т-системы иммунитета.

В наших исследованиях повышение количественного показателя сопровождается повышением функциональной активности Т-системы иммунитета. Повышение лимфокинпродуцирующей способности лейкоцитов

характеризуется уменьшением индекса миграции в РТМЛ на ФГА с 0,8+0,06 до 0,50+0,05 (Р<0,05) после стрессорного воздействия. Оценка Т-системы иммунитета в ранние сроки стрессорного воздействия выявила повышение клеточного иммунного ответа и на всем протяжении эксперимента функцио-нальная активность Т-системы оставалась повышенной. В эти же интервалы времени достоверно повышены фагоцитарная способность лейкоцитов и нейтрофилов, что обусловливается высоким фагоцитозом, фагоцитарным числом и нарастанием НСТ –теста.

Снижение процесса антителогенеза связано с уменьшением содержания Т- и В-лимфоцитов и их предшественников и с функциональной недостаточностью кооперирующихся клеток. Кроме того, дисбаланс иммунорегуляторных клеток приводит к уменьшению процессов кооперации иммунных клеток, что приводит к угнетению антителогенеза, которое отрицательно сказывается на составе иммуноглобулинов. Причем неантигенные раздражители влияют не только на рецепторный аппарат, но и на структуру мембраны клетки /258, 268/.

Существенное изменение наблюдается в гуморальном звене иммунитета и в наших экспериментах при эмоциональном стрессе. Активность гуморального звена иммунитета наиболее адекватно отражает уровень концентрации ЦИК в сыворотке крови, содержание АТОК в селезенке, и индекса супрессии. Эмоциональный стресс вызывает увеличение содержания В-клеток, снижение АТОК в селезенке в 2 раза. Индекс супрессии на всем протяжении эксперимента превышал 50% /4/. Соответственно уменьшению содержания АТОК в селезенке у животных были низкие концентрации ЦИК в сыворотке крови.

А.Г. Чучалин и дp. /260/ считают, что pеализация повpеждающего действия ЦИК пpоисходит пpи снижении фагоцитаpной активности моноцитаpных макpофагов или пpи активации комплемента. Поскольку антитела связываются с антигенными детеpминатами на клеточной мембpане, то весь каскад активации компонентов комплемента сопpовождается выделением гистамина, усилением хемотаксиса, pазpушением клеточной мембpаны, что пpиводит к цитолизу. Последний, в свою очеpедь, вызывает выбpос медиатоpов, выделение лизосомальных пpотеаз и повpеждение мембpан сосудов, активацию кининовой системы, фактоpа Хагемана.

Снижение АТОК в селезенке оказывает непосpедственное влияние на концентpацию ЦИК в сывоpотке кpови. В нашем экспеpименте концентpация ЦИК, по-видимому, зависела от степени фагоцитаpной активности нейтpофилов и обpазования АТОК в селезенке.

Полученные данные указывают на иммунные потенции различных звеньев иммунитета при эмоциональном стрессе и являются основанием коррекции нарушенных звеньев иммуногенеза.

Разработка биохимических основ и иммунологических процессов действия физических методов лечения позволит также понять теоретические и клинические принципы построения профилактических и лечебных мероприятий при действии стрессорных факторов. Поэтому большое внимание в работе уделено биохимическим и иммунологическим методам выявления состояния функций адаптивных систем и их изменениям под влиянием физических методов лечения.

Минеральные вещества, содержащие в глине, способствуют росту, так как регулируют усвоение белков, жиров и углеводов.

Глины применяют как присыпки и компрессы в дерматологии и косметологии. Широко известны методики применения при мастопатии, зобе щитовидной железы, опухолевых процессах /129, 130, 131/. В случае недостатка кремния в организме во многих органах, в том числе и в железах внутренней секреции задерживается формирование новых клеток. Органические формы на глинистых массах, структурированные с кремнием –

это уникальные биокатализаторы, способные перерабатывать энергию света и в десятки раз ускорять окислительно-восстановительные реакции в водных растворах организма. Эти же биологически активные вещества являются основой для построения сложных органических соединений – гемоглобина в теле человека, хлорофилла – в растениях. /129-131/.

В доступной литературе мы не встретили работ о его влиянии на иммунологическую реактивность при эмоциональном стрессе, так же нет данных о ее влиянии на обменные процессы.

Для определения эффективности действия минерального препарата в опытной группе нами изучено влияние природной глины- тагансорбента на показатели клеточного, гуморального и фагоцитарного звеньев иммунитета через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия в эксперименте. Из таблицы 5 и рис 1 видно, что на фоне глинотерапии общее число лейкоцитов постепенно увеличивалось и максимального значения достигало на 2 сутки после стрессорного воздействия. В этот период его значения достоверно превосходили показатели контрольной группы. На 3 сутки число лейкоцитов не отличались от исходного уровня, но достоверно были ниже по отношению к контрольным данным.

У интактных животных курс глинотерапии повышал относительное и абсолютное содержание лимфоцитов до 69,4+4,5% и 4119+391 в 1 мкл соответственно (Р<0,001) по отношению к контрольному показателю. Через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия в опытной группе отмечалось снижение абсолютного числа лимфоцитов по отношению к контролю в изучаемые сроки При этом абсолютное содержание лимфоцитов в опытной группе не отличалось от исходного уровня. Относительное содержание лимфоцитов после стрессорного воздействия на фоне глинотерапии достоверно снижалось к исходному через 1 сутки, возвращалось к исходному уровню через 2 сутки и вновь снижалось через 3 сутки (Р<0,05). Достоверных отличий по отношению к контролю в изучаемые сроки не выявлено.

У интактных животных после глинотерапии повышалось относительное содержание общих Т-лимфоцитов. После стрессорного воздействия содержание общих лимфоцитов через 1 и 2 сутки не изменялось по отношению к исходным и контрольным данным и только на 3 сутки относительное и абсолютное содержание общих Т- лимфоцитов достоверно снизились по отношению ко всем сравниваемым группам (Р<0,05).

По-видимому, стабилизация лимфоцитов способствует уменьшению дисбаланса в системе иммунорегуляторных клеток.

Таблица 5

Показатели клеточного иммунитета при эмоциональном стрессе на фоне природной глины

Примечание: 1 - %, 2 – абс. числа, ^о – достоверность к исходному (P<0,05),

^{о о} -(P<0,001).

* - достоверность к контролю (P<0,05), ** - (P<0,001)

Глинотерапия у интактных животных достоверно повышала число Т-хелперов. В опытной группе после глинотерапии через 1 сутки после стрессорного воздействия и относительное и абсолютное число Т-хелперов понижались, на 2 сутки повышались до исходного значений, на 3 сутки, как и в контрольной группе, снижались и были достоверно ниже исходного уровня.

После курса глинотерапии относительное содержание Т-супрессоров достоверно увеличивалось через 1 сутки после стрессорного воздействия, на 2 сутки снижалось до 5,2+1,2% (Р<0,05) и на 3 сутки соответствовало исходному уровню. Абсолютное количество Т-супрессоров через 1 сутки после стрессорного воздействия увеличилось в 1,5 раза (Р<0,001), на 2 сутки снизилось в 1,9 раза, через 3 сутки имела тенденцию к увеличению и была ниже исходного и контрольного уровней. При этом на всем протяжении эксперимента абсолютное количество Т-супрессоров было меньше