Читайте также:
|
Перед заражением КЭ скорлупа на месте вскрытия или инъекции обрабатывается спиртом, обжигается, затем обрабатывается 5% раствором йода и вновь обжигается. Можно обрабатывать йодированным спиртом. Только после этого делаем прокол или вскрытие скорлупы. Методов заражения КЭ много, основные из них следующие:
1. Заражение на хорион- аллантоисную оболочку. КЭ должен быть 7-10 дневного возраста. На хорион-аллантоисной оболочке можно культивировать вирусы оспы, ящура. Доза заражения - 0,1 мл. Имеются три метода заражения на хорионаллантоисную оболочку:
А. Со стороны пути. Ножницами вскрывают пугу, иглой или пинцетом отпрепаровываем второй листок подскорлуповой оболочки в месте хорошо развитых кровеносных сосудов, наносим вирусосодержащий материал и тем же листком прикрываем. Окошечко в скорлупе закрывается покровным стеклом (или мелким часовым стеклом) и заливаем парафином.
Б. На границе пуги выпиливается скорлупа - 5x5x5 мм, отпрепаровывается подскорлуповая оболочка, а затем все также как в пункте "а".
С. Окошечко делается сбоку против зародыша. В этом случае иногда надо делать противоотверстие со стороны пуги и с помощью груши отсасывать воздух.
2. Заражение в аллантоисную полость. Применяется чаще других. Возраст эмбриона 9-11 дней. Доза заражения - 0,1 мл. Можно культивировать вирус гриппа, чумы птиц, чумы собак, инфлуэнцы. Существует два способа.
А. Через пугу. Делаем отверстие для иглы. Иглу погружаем настолько, чтобы попасть в аллантоисную полость. После введения вируссодержащего материала отверстие закрываем расплавленным парафином.
Б. Против предлежания К.Э. Яйцо фиксируем крестиком вверх, отступив от крестика 2-3 мм вверх делаем прокол иглой приблизительно на 0,5 см. Отверстие закрываем парафином.
3. Заражение в амниотическую полость. Возраст эмбриона 9-11 дней. Доза заражения - 0,1 мл. Существует два способа.
А. Через пугу. Делаем отверстие для иглы. Иглу погружаем настолько, чтобы попасть в амниотическую полость. После введения вируссодержащего материала отверстие закрываем расплавленным парафином.
Б. Против предлежания К.Э. Яйцо фиксируем крестиком вверх, отступив от крестика 2-3 мм вверх делаем прокол иглой приблизительно на 1,5 см. Отверстие закрываем парафином.
3. В желточный мешок. В этом случае используют 5-7 дневные эмбрионы. Доза заражения 0,5-1,0 мл. Применяют при орнитозе, пситтакозе, энцефалитах, риккетсиозах, бруцеллезе. Существует два способа.
А. Яйцо фиксируется крестиком вниз, сверху в центре яйца делается прокол скорлупы и вводится игла на 1,5-2 см, чтобы попасть в желточный мешок. Отверстие закрывается парафином.
Б. Яйцо оставляют в том же положении, прокол делают со стороны пути, иглу вводим с уклоном вверх, чтобы попасть в желточный мешок на 3-4 см. Отверстие закрывается парафином.
Зараженные куриные эмбрионы помещают в термостат для дальнейшей инкубации при температуре +37°С - +38°С в процессе которой происходит культивирование вирусов.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ:
1. Студенты знакомятся с видами лабораторных животных.
2. Студенты проводят интраназальное и внутримышечное заражение белых мышей.
3. Студенты наблюдают за состоянием лабораторного животного после заражения.
4. Студенты знакомятся с методами заражения куриных эмбрионов.
5. Студенты проводят овоскопию куриных эмбрионов.
6. Студенты заражают куриные эмбрионы.
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:
1. Для каких целей и какими методами заражают лабораторных животных в вирусологической практике?
2. Каковы признаки наличия вируса в организме лабораторных животных?
3. Каковы особенности культивирование вирусов в организме лабораторных животных?
4. Для каких целей заражают курные эмбрионы?
5. Каково преимущество заражения куриных эмбрионов?
6. Каковы методы заражения куриных эмбрионов?
Дата добавления: 2014-12-20; просмотров: 216 | Поможем написать вашу работу | Нарушение авторских прав |